山东液相色谱系统的固定相和分离条件的选择

点击次数：1496 更新时间：2018-08-24

山东液相色谱系统与试样预处理技术相配合，HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。

山东液相色谱系统固定相：

1、载体：

（1）表面多孔型载体：由直径为30～40um的实心玻璃球和厚度为1～2um的多孔性外层组成。

（2）全多孔型载体：由硅胶和硅藻土等材料制成的直径为30～50um的多孔型颗粒。

（3）全多孔型微粒载体：由纳米级的硅胶微粒堆积而成，又称堆积硅珠。载体粒度为5～10um，由于颗粒小，所以柱效高，是目前使用广泛的一种载体。

2、固定液：

采用化学键合固定相。

3、柱填充技术：

（1）干法填充：适合直径大于20um的填料。

（2）湿法填充：高压匀浆填充。

山东液相色谱系统分离条件的选择

一、减小柱内展宽：

1、固定相：选用粒径小、分布均匀的球形固定相。化学键合相，匀浆法装柱。

2、流动相：选用低粘度的流动相，有利于增大组分在溶剂中的扩散系数，减少传质阻力。

3、流速：约1mL/min。

4、柱温：25℃左右。

二、减少柱外展宽：

1、柱前展宽：主要由进样引起，减小进样器的死体积。

2、柱后展宽：主要由接管、检测器流通池体积和检测器响应时间等引起。

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